Detaillierte Erläuterung der Reagenzusvolatilisation in PCR -Experimenten

Detaillierte Erläuterung der Reagenzusflüchtigung in PCR -Experimenten.

Im PCR -Experiment decken wir nach dem Hinzufügen des Reaktionssystems den Deckel sorgfältig ab und bestätigen wiederholt, dass der Deckel geschlossen ist, um eine Reagenzusflüchtigung zu vermeiden. Aber manchmal haben wir auch Zweifel: Wir haben bestätigt, dass der Deckel eng geschlossen ist, aber nachdem das Experiment abgeschlossen ist, wird das Reagenz immer noch verdampft. was ist der Grund?

Tatsächlich ist die Reagenzusvolatilisation eines der häufigsten Probleme bei PCR -Experimenten, und es gibt viele Faktoren, die die Reagenzusflüchtigung beeinflussen.

Die Verdunstung bezieht sich auf das während des PCR -Experiments in einer Änderung der Konzentration der Reaktionslösung. Änderungen, die Menge an Reaktionslösung nahm ab und einige verdampften sogar zur Trockenheit, was zu ungültigen Experimenten führte.

1. Heißer Deckeldruck, Temperatur

In PCR -Experimenten erhitzen wir den Deckel normalerweise, um die Kondensation von Reagenzdampf zu verhindern. Die Temperatur des erhitzten Deckels ist normalerweise höher als die der Reaktionslösung, um die Kondensation von Dämpfen zu verhindern.

Thermische Cycler-Erwärmungsdeckel können grob in die folgenden vier Arten unterteilt werden: nicht anpassbare Heizdeckel, verstellbare Heizdeckel, adaptive Heizdeckel und automatische Heizdeckel. Einstellbarer, erhitzter Deckel verfügt über eine Finger-Lebens-Kompression. Wenn nicht fest angezogen, verdampfen die Reagenzien. Die Kantenverdampfung kann minimiert werden, indem der Druck auf den erhitzten Deckel erhöht wird. Manchmal kann das Röhrchen die Röhre einklemmen und den Knopf verdrehen. Unter normalen Umständen kann die elektrische Smart -Heizungsabdeckung Verbrauchsmaterialien unterschiedlicher Höhen automatisch erkennen, die Verbrauchsmaterialien automatisch komprimieren und der Druck gleichmäßig und konstant ist, wodurch die Verdunstung und die manuellen Fehler reduziert werden und die experimentelle Genauigkeit und Wiederholbarkeit verbessert werden.

2. Verformung von Verbrauchsmaterialien

Bei Dampflecks denken die meisten Leute, dass der heiße Deckeldruck nicht ausreicht. Der Druck des heißen Deckels ist sehr wichtig, aber das ist nur ein Aspekt. In der Tat sind auch Verbrauchsmaterialien sehr wichtig.

PCR -Öffnungsplatten bestehen normalerweise aus Kunststoffmaterialien, die sich nach dem Erhitzen erheblich ausdehnen und verformen. Die thermische Expansionsrate der PCR -Metallbasis, mit der die PCR -Öffnungsplatte platziert wird, ist extrem niedrig, und die PCR -Öffnungsplatte kann sich nach der thermischen Ausdehnung nicht normalerweise entlang der Ebene ausdehnen. Der prall gefüllte Zustand macht die obere Wärmeabdeckung nicht in der Lage, die Oberfläche der PCR -Öffnungsplatte vollständig zu kontaktieren, was zu ungleichmäßiger Temperatur und Druck führt, was zu einer Reagenzverdunstung am Rand der PCR -Öffnungsplatte führt und den PCR -Detektionseffekt beeinflusst.

3. Verbrauchsmaterialien sind nicht fest versiegelt

Die Enge des thermischen Deckels und der Verbrauchsmaterialien bedeutet nicht, dass die PCR -Rohrkappe eng geschlossen ist und die Qualität der PCR -Brunnenplatte ungleichmäßig ist. Hochwertige Verbrauchsmaterialien, die Oberfläche der Düse und die Abdeckung sind glatt, und die Dichtung hinter der Boxabdeckung ist gut und es ist nicht einfach zu lecken. Minderwertige Verbrauchsmaterialien haben ungleichmäßige Ausgüsse und radiale Linien, die leicht zu Leckagen oder sogar trocknen können.

Versuchen Sie daher in PCR-Experimenten, hochwertige und geeignete Verbrauchsmaterialien zu wählen. Gleichzeitig kann das Reaktionssystem erweitert werden, um den Einfluss der Systemverdunstung auf die Reaktion zu minimieren.